Регенерация сухожилий идёт медленно, и новая ткань на месте разрыва часто получается слабее прежней. Специалисты нашей компании «Т-Хелпер Клеточные Технологии» вместе с учёными МВА имени К.И. Скрябина и НИИ морфологии человека имени академика А.П. Авцына проверили, как Репарин-Хелпер® влияет на заживление сухожилия. Исследование провели на 95 крысах, а результаты опубликовали в 2023 году в журнале «Клиническая и экспериментальная морфология».
Через 60 суток после разрыва сухожилие у животных, получавших Репарин-Хелпер®, по толщине, числу клеток и сосудов было близко к здоровой ткани. Без препарата на месте разрыва остался рубец с бедной сетью сосудов.
Почему сухожилие заживает плохо
Сухожилие состоит в основном из плотных пучков коллагеновых волокон, которые лежат параллельно друг другу и поэтому выдерживают большую нагрузку при движении. При тендините, то есть воспалении сухожилия, заживление обычно заканчивается рубцом и очагами дистрофии. В очагах дистрофии ткань питается и обновляется хуже нормы. Под нагрузкой в этих местах снова возникают микроразрывы, поэтому болезнь затягивается и возвращается. Консервативное лечение часто помогает недостаточно, а после операций, в том числе с пересадкой ткани, в сухожилии тоже остаются рубцовые изменения.
Тендинит у лошади и наше исследование
Тендинит у лошади знаком многим владельцам спортивных лошадей, потому что сухожилия на ногах лошади несут большую нагрузку на скорости и на прыжках. Одна из авторов исследования, Е.Н. Борхунова, раньше изучала, как меняется сухожилие поверхностного сгибателя пальца у лошадей при тендините. Рубец в сухожилии остаётся местом наименьшей устойчивости, и от качества новой ткани зависит возвращение лошади к прежней работе. Поэтому мы проверили, помогает ли Репарин-Хелпер® сухожилию восстановиться без грубого рубца.
Секретом стромальных клеток и Репарин-Хелпер®
Секретомом называют набор белков, которые клетки выделяют в окружающую среду. Мезенхимальные стромальные клетки (МСК) есть в организме у млекопитающих. В месте повреждения они выделяют цитокины и факторы роста, то есть сигнальные белки, которые регулируют воспаление и восстановление ткани. В исследовании применяли Репарин-Хелпер®. Как работает препарат, рассказано на странице о механизме действия.
Как устроено исследование
В исследовании участвовали 95 белых беспородных крыс-самцов массой 120 граммов, их разделили на три группы. Крысам из первых двух групп под наркозом полностью перерезали пяточное сухожилие и сшили его хирургическим швом. В контрольной группе (35 крыс) рану промывали физиологическим раствором, а в опытной группе (35 крыс) промывали препаратом Репарин-Хелпер®. Через 7 суток препарат повторно ввели в ткань вокруг сухожилия. Третья группа из 25 здоровых крыс дала нормальные значения для сравнения.
Ткань изучали на 1-е, 7-е, 14-е и 60-е сутки под световым и электронным микроскопом. После первых суток на каждый срок обследовали по 10 крыс в каждой оперированной группе. Толщину регенерата, то есть новой ткани на месте разрыва, а также число клеток и сосудов в нём измеряли на 7-е, 14-е и 60-е сутки.
Как Репарин-Хелпер® помог регенерации сухожилий
С первых суток воспалительный отёк и разрушение ткани у крыс, получавших Репарин-Хелпер®, были менее выражены, чем в контрольной группе. Под электронным микроскопом в опытной группе не нашли признаков фибриноидного набухания и выраженного некроза, а в контрольной группе такие изменения были. Фибриноидным набуханием называют одну из форм повреждения коллагеновых волокон, а некрозом называют гибель ткани.
При применении Репарин-Хелпер® новая ткань собиралась в пучки коллагеновых волокон уже на 7-е сутки, на неделю раньше, чем в контрольной группе. Регенерат в опытной группе был толще на 7-е сутки (1430 против 1070 мкм) и на 14-е сутки (1240 против 889 мкм). Оба различия статистически значимы (p≤0,05).
К 60-м суткам сухожилие в опытной группе по строению приблизилось к здоровому. Толщина регенерата составила 743 мкм при норме 725 мкм, а в контрольной группе только 582 мкм. Фибробластов, то есть клеток, которые строят коллагеновые волокна, в опытной группе было 44 в поле зрения микроскопа при норме 36, а в контрольной группе 64. Мелких кровеносных сосудов в опытной группе было 6 в поле зрения, как у здоровых крыс, а в контрольной группе вдвое меньше. Все эти различия между группами статистически значимы (p≤0,05).
В контрольной группе к 60-м суткам на месте разрыва оставалась рубцовая ткань с бедной сетью сосудов, и часть пучков волокон шла в разных направлениях. У крыс, получавших Репарин-Хелпер®, пучки лежали параллельно, как в здоровом сухожилии, а сеть капилляров соответствовала норме.
Где прочитать статью
Полный текст статьи можно открыть в PDF на нашем сайте. В том же журнале раньше вышло наше исследование о регенерации роговицы под действием секретома, а остальные работы по препарату собраны на странице «Исследования и документы».
Что делать владельцу при подозрении на тендинит
Покажите лошадь ветеринарному врачу, если она захромала или сухожилие на ноге стало горячим, припухлым или болезненным при ощупывании. Врач определяет степень повреждения сухожилия осмотром и ультразвуком, и от неё зависят лечение и сроки возвращения к работе. Ваш ветеринарный врач может рекомендовать Репарин-Хелпер® в составе лечения.